Στις 28 Νοεμβρίου 1965 τα “λιοντάρια” έδωσαν τον πρώτο τους αγώνα στην Α’ Εθνική/Super League και επικράτησαν με 1-0 της Νίκης Βόλου στην έδρα τους χάρη σε γκολ του Τσακίρη.
Εκείνη την ημέρα πήραν το “βάπτισμα του πυρός” στη μεγάλη κατηγορία και πλέον διανύουν την 25η σεζόν τους στο πρωτάθλημα.
Η αναμέτρηση του Σαββάτου 25 Νοεμβρίου 2023 με τον ΠΑΟΚ στην Τούμπα ήταν η 800η στην ιστορία του Πανσερραϊκού και έχει σημειώσει 207 νίκες – 211 ισοπαλίες και 382 ήττες. Σε αυτές τις αναμετρήσεις έχουν σημειωθεί 1810 τέρματα, με την ομάδα των Σερρών να έχει σκοράρει 703 φορές και 1107 οι αντίπαλοί της. Οι 798 αγώνες είναι για την κανονική διάρκεια του πρωταθλήματος, ενώ έχει και δύο αγώνες κατάταξης την σεζόν 1965-66.
Τα περισσότερα παιχνίδια στην κατηγορία με τα χρώματα του Πανσερραϊκού έχει ο Δημήτρης Ηλιάδης, ο οποίος αγωνίστηκε από την παρθενική συμμετοχή της ομάδας στη μεγάλη κατηγορία μέχρι και το 1975-76 και είχε συνολικά 257 παρουσίες.
Ο Γιώργος Μπιτζίδης με 48 γκολ είναι ο κορυφαίος σκόρερ της ομάδας των “λιονταριών” σε επίπεδο Α’ Εθνικής/Super League, ενώ ο Βλαντιμίρ Ταμπόρσκι είναι ο προπονητής που έχει τα περισσότερα παιχνίδια στην τεχνική ηγεσία του Πανσερραϊκού στην μεγάλη κατηγορία, αφού κάθισε 112 φορές στον πάγκο για το πρωτάθλημα